会释放有毒物质吗。毕竟是奶嘴刷。
聚氨酯是一种理化性能和血液相容性兼优的高分子材料，具有强度高，性能好，易加工成形，容易粘合的特点。为制造人工心脏血囊或隔膜的首选材料。目前国内外一些学者正在开展聚氨酯海绵作为制备经皮冠脉腔内成形术（ＰＴＣＡ）的导管气囊材料的研究。为了解和评价聚氨酯作为医用生物材料应用于人体的安全性，本研究通过细胞毒性试验和溶血试验，观察聚氨酯对小鼠成纤维细胞（Ｌ－９２９细胞株）生长和增殖影响以及对兔的溶血毒性，评价其潜在毒性作用，为临床安全使用提供科学依据。材料与方法一、材料１受试物：聚氨酯海绵１号、２号，其中聚氨酯海绵１号为国内产品，２号为进口产品。２动物和细胞：新西兰兔由本校动物实验中心提供。小鼠成纤维细胞株Ｌ－９２９（传代４８～７２小时，成为生长旺盛细胞时备用）。３试剂：小牛血清、ＥＤＴＡ、胰酶、ＤＭＥＭ细胞培养液、Ｈａｎｋｓ液、２％草酸钾、０９％ＮａＣｌ注射液。二、方法１ 细胞毒性试验：样品制备：聚氨酯海绵切成０５ｃｍ×２ｃｍ薄片，高压消毒，加ＤＭＥＭ１０ｍｌ／ｃｍ２（１００ｋｌ／ｍ２）放置２４小时，制成受试液。细胞培养：将生长旺盛的Ｌ－９２９细胞用消化液消化，加适量细胞培养液吹打均匀，调整为４×１０７／Ｌ的细胞悬液备用。取培养瓶４３只，随机分为阴性对照组（１３瓶），阳性对照组和二个受试物组（各为１０瓶），每瓶分别加入细胞培养液４ｍｌ，细胞悬液１ｍｌ，置３７℃含５％ＣＯ２的细胞培养箱中培养２４小时。细胞贴壁生长后，弃去培养液，阴性对照组分别加入新鲜的ＤＭＥＭ细胞培养液，阳性对照组加入含６３％苯酚的ＤＭＥＭ细胞培养液，二个受物组分别加入含５０％受试液的ＤＭＥＭ细胞培养液，置３７℃含５％ＣＯ２的细胞培养箱中继续培养。观察与计算：在更换培养液的当天，取阴性对照组３瓶，并在更换后第２、４、７天，每组各取３瓶混合均匀后进行细胞形态学观察和细胞计数。细胞形态用倒置显微镜观察，细胞计数用血球计数板在显微镜下进行，按公式１计算细胞浓度。公式１：细胞浓度＝四角４大格内细胞总数４×１００００［１］按公式２计算细胞相对增殖度（ＲＧＲ）公式２ＧＲ％＝受试物组（或阳性对照组）细胞浓度平均值阴性对照组细胞浓度平均值×１００％［２］２ 溶血试验：样品制备：取聚氨酯海绵１号切成０５ｃｍ ×２ｃｍ薄片，制成受试物。稀释抗凝兔血制备：新西兰兔１只（体重２ｋｇ）心脏取血２０ｍｌ，加２％草酸钾１ｍｌ混匀，从中取８ｍｌ与０９％ＮａＣｌ注射液１０ｍｌ混和备用。实验测定：实验组每管分别加入５ｇ受试物和０９％ＮａＣｌ注射液１０ｍｌ；阴性对照组每管加入０ ９％ＮａＣｌ注射液１０ｍｌ；阳性对照组每管加入蒸馏水１０ｍｌ。实验组、阴性对照组和阳性对照组分别测定三管作平行样。全部试管３７℃恒温水浴３０分钟后，每管加入０２ｍｌ稀释抗凝兔血，轻轻摇匀，３７℃水浴６０分钟后离心（２５００ｒ／ｍｉｎ，５分钟），取上清液移入比色杯中，用７５３ＢＩ型分光光度计（５４５ｎｍ波长）测定吸光度，按公式３求溶血率。公式３：溶血率（％）＝受试物组吸光度－阴性对照组吸光度阳性对照组吸光度－阴性对照组吸光度 ×１００％［２］结果与分析一、细胞形态学变化２个受试物组的细胞形态与阴性对照组细胞基本相同，在２、４、７天细胞呈梭形或三角型，贴壁良好，生长旺盛。阳性对照组细胞在培养第二天有近１／３死亡，余下细胞贴壁生长不佳，细胞圆缩。第四天时９０％的细胞死亡，细胞培养液呈混浊状。二、细胞生长与增殖情况从表１可见：阳性对照组细胞数目在２天时已明表１聚氨酯海绵对Ｌ－９２９细胞浓度的影响组别培养不同时间细胞浓度（个／Ｌ）２天４天７天聚氨酯海绵１４ ６４×１０７６５８×１０７９４１×１０７聚氨酯海棉２５０７×１０７７４１×１０７１０２８×１０７阴性对照组５３３×１０７７７１×１０７１０６７×１０７阳性对照组３５７×１０７０７８×１０７－显减少，４天剧减９０％，７天已全部死亡。阴性对照组与二个受试物组细胞数目均未见明显减少。由表２可知，国产和进口聚氨酯海绵两组的细胞平均相对增殖度分别为８６９％和９５９％。本细胞毒性试验表明国产和进口聚氨酯海绵均属ＲＧＲ分级标准１级（７５％～９９％）［２］，判为合格，即对细胞无毒性作用。表２聚氨酯海绵对Ｌ－９２９细胞ＲＧＲ的影响组别培养不同时间细胞ＲＧＲ（％）２天４天７天平均值聚氨酯海绵１８７２８５４８８２８６９聚氨酯海绵２９５３９６２９６４９５９三、溶血率从表３可见各组吸光度平均值分别为聚氨酯１号０００７７、阴性对照组０００５３、阳性对照组０５３８０，由公式３计算出聚氨酯１号的溶血率为３９３％。溶血试验显示国产聚氨酯海绵溶血率小于５％［２］，无溶血毒性。表３溶血试验每组各管吸光度的变化组别吸光度１管２管３管ｘ±ｓＰ值阴性对照组０００３０００５０００８０００５３±０００２聚氨酯海绵０００６０００７００１００００７７±０００３＞００５阳性对照组０ ５０４０５９６０５１４０５３８０±００５＜０００１以上结果表明，聚氨酯海绵可以作为医学生物材料应用于人体组织，而且国产聚氨酯产品与进口产品相比，未见毒性上明显差异，安全指标上达到同类进口产品要求聚氨酯海绵细胞毒性和溶血毒性研究$中山医科大学公共卫生学院@魏青@刘力@杨杏芬聚氨酯, 细胞毒作用, 溶血为评价聚氨酯海绵应用于人体的安全性，给临床安全使用提供可靠依据，本实验采用细胞毒性和溶血毒性试验方法，检测聚氨酯海绵是否存在细胞毒性和溶血反应。结果显示：聚氨酯海绵对Ｌ－９２９细胞株无毒性作用，对兔血无溶血反应。结果表明，聚氨酯海绵可以作为医用材料使用１］鄂征组织培养技术北京∶人民卫生出版社，１９８８∶１１２～１３０［２］中华人民共和国国家标准（ＧＢ／Ｔ１４２３３２－９３） 医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分∶生物试验法第一版北京∶中国标准出版社，１９９３００５０００８０００５３±
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聚氨酯是一种理化性能和血液相容性兼优的高分子材料，具有强度高，性能好，易加工成形，容易粘合的特点。为制造人工心脏血囊或隔膜的首选材料。目前国内外一些学者正在开展聚氨酯海绵作为制备经皮冠脉腔内成形术（ＰＴＣＡ）的导管气囊材料的研究。为了解和评价聚氨酯作为医用生物材料应用于人体的安全性，本研究通过细胞毒性试验和溶血试验，观察聚氨酯对小鼠成纤维细胞（Ｌ－９２９细胞株）生长和增殖影响以及对兔的溶血毒性，评价其潜在毒性作用，为临床安全使用提供科学依据。材料与方法一、材料１受试物：聚氨酯海绵１号、２号，其中聚氨酯海绵１号为国内产品，２号为进口产品。２动物和细胞：新西兰兔由本校动物实验中心提供。小鼠成纤维细胞株Ｌ－９２９（传代４８～７２小时，成为生长旺盛细胞时备用）。３试剂：小牛血清、ＥＤＴＡ、胰酶、ＤＭＥＭ细胞培养液、Ｈａｎｋｓ液、２％草酸钾、０９％ＮａＣｌ注射液。二、方法１ 细胞毒性试验：样品制备：聚氨酯海绵切成０５ｃｍ×２ｃｍ薄片，高压消毒，加ＤＭＥＭ１０ｍｌ／ｃｍ２（１００ｋｌ／ｍ２）放置２４小时，制成受试液。细胞培养：将生长旺盛的Ｌ－９２９细胞用消化液消化，加适量细胞培养液吹打均匀，调整为４×１０７／Ｌ的细胞悬液备用。取培养瓶４３只，随机分为阴性对照组（１３瓶），阳性对照组和二个受试物组（各为１０瓶），每瓶分别加入细胞培养液４ｍｌ，细胞悬液１ｍｌ，置３７℃含５％ＣＯ２的细胞培养箱中培养２４小时。细胞贴壁生长后，弃去培养液，阴性对照组分别加入新鲜的ＤＭＥＭ细胞培养液，阳性对照组加入含６３％苯酚的ＤＭＥＭ细胞培养液，二个受物组分别加入含５０％受试液的ＤＭＥＭ细胞培养液，置３７℃含５％ＣＯ２的细胞培养箱中继续培养。观察与计算：在更换培养液的当天，取阴性对照组３瓶，并在更换后第２、４、７天，每组各取３瓶混合均匀后进行细胞形态学观察和细胞计数。细胞形态用倒置显微镜观察，细胞计数用血球计数板在显微镜下进行，按公式１计算细胞浓度。公式１：细胞浓度＝四角４大格内细胞总数４×１００００［１］按公式２计算细胞相对增殖度（ＲＧＲ）公式２ＧＲ％＝受试物组（或阳性对照组）细胞浓度平均值阴性对照组细胞浓度平均值×１００％［２］２ 溶血试验：样品制备：取聚氨酯海绵１号切成０５ｃｍ ×２ｃｍ薄片，制成受试物。稀释抗凝兔血制备：新西兰兔１只（体重２ｋｇ）心脏取血２０ｍｌ，加２％草酸钾１ｍｌ混匀，从中取８ｍｌ与０９％ＮａＣｌ注射液１０ｍｌ混和备用。实验测定：实验组每管分别加入５ｇ受试物和０９％ＮａＣｌ注射液１０ｍｌ；阴性对照组每管加入０ ９％ＮａＣｌ注射液１０ｍｌ；阳性对照组每管加入蒸馏水１０ｍｌ。实验组、阴性对照组和阳性对照组分别测定三管作平行样。全部试管３７℃恒温水浴３０分钟后，每管加入０２ｍｌ稀释抗凝兔血，轻轻摇匀，３７℃水浴６０分钟后离心（２５００ｒ／ｍｉｎ，５分钟），取上清液移入比色杯中，用７５３ＢＩ型分光光度计（５４５ｎｍ波长）测定吸光度，按公式３求溶血率。公式３：溶血率（％）＝受试物组吸光度－阴性对照组吸光度阳性对照组吸光度－阴性对照组吸光度 ×１００％［２］结果与分析一、细胞形态学变化２个受试物组的细胞形态与阴性对照组细胞基本相同，在２、４、７天细胞呈梭形或三角型，贴壁良好，生长旺盛。阳性对照组细胞在培养第二天有近１／３死亡，余下细胞贴壁生长不佳，细胞圆缩。第四天时９０％的细胞死亡，细胞培养液呈混浊状。二、细胞生长与增殖情况从表１可见：阳性对照组细胞数目在２天时已明表１聚氨酯海绵对Ｌ－９２９细胞浓度的影响组别培养不同时间细胞浓度（个／Ｌ）２天４天７天聚氨酯海绵１４ ６４×１０７６５８×１０７９４１×１０７聚氨酯海棉２５０７×１０７７４１×１０７１０２８×１０７阴性对照组５３３×１０７７７１×１０７１０６７×１０７阳性对照组３５７×１０７０７８×１０７－显减少，４天剧减９０％，７天已全部死亡。阴性对照组与二个受试物组细胞数目均未见明显减少。由表２可知，国产和进口聚氨酯海绵两组的细胞平均相对增殖度分别为８６９％和９５９％。本细胞毒性试验表明国产和进口聚氨酯海绵均属ＲＧＲ分级标准１级（７５％～９９％）［２］，判为合格，即对细胞无毒性作用。表２聚氨酯海绵对Ｌ－９２９细胞ＲＧＲ的影响组别培养不同时间细胞ＲＧＲ（％）２天４天７天平均值聚氨酯海绵１８７２８５４８８２８６９聚氨酯海绵２９５３９６２９６４９５９三、溶血率从表３可见各组吸光度平均值分别为聚氨酯１号０００７７、阴性对照组０００５３、阳性对照组０５３８０，由公式３计算出聚氨酯１号的溶血率为３９３％。溶血试验显示国产聚氨酯海绵溶血率小于５％［２］，无溶血毒性。表３溶血试验每组各管吸光度的变化组别吸光度１管２管３管ｘ±ｓＰ值阴性对照组０００３０００５０００８０００５３±０００２聚氨酯海绵０００６０００７００１００００７７±０００３＞００５阳性对照组０ ５０４０５９６０５１４０５３８０±００５＜０００１以上结果表明，聚氨酯海绵可以作为医学生物材料应用于人体组织，而且国产聚氨酯产品与进口产品相比，未见毒性上明显差异，安全指标上达到同类进口产品要求聚氨酯海绵细胞毒性和溶血毒性研究$中山医科大学公共卫生学院@魏青@刘力@杨杏芬聚氨酯, 细胞毒作用, 溶血为评价聚氨酯海绵应用于人体的安全性，给临床安全使用提供可靠依据，本实验采用细胞毒性和溶血毒性试验方法，检测聚氨酯海绵是否存在细胞毒性和溶血反应。结果显示：聚氨酯海绵对Ｌ－９２９细胞株无毒性作用，对兔血无溶血反应。结果表明，聚氨酯海绵可以作为医用材料使用１］鄂征组织培养技术北京∶人民卫生出版社，１９８８∶１１２～１３０［２］中华人民共和国国家标准（ＧＢ／Ｔ１４２３３２－９３） 医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分∶生物试验法第一版北京∶中国标准出版社，１９９３００５０００８０００５３±